關(guān)于核酸提取系列去了解一下
發(fā)布時(shí)間：
2021/09/15 00:00
快速核酸提取儀主要用于核酸提取、核酸蛋白提取和分離。在操作過(guò)程中，只需添加樣本核酸，儀器自動(dòng)完成提取純化的整個(gè)過(guò)程，減少了提取過(guò)程中手動(dòng)添加試劑過(guò)程。
拆包裝、消毒、提取核酸采樣……一系列看似簡(jiǎn)單的操作無(wú)時(shí)無(wú)刻不在考驗著(zhù)核酸采樣檢測者的細心和耐心。帶領(lǐng)的檢驗室有25人，平均年齡不到25周歲，每個(gè)人都夜以繼日地堅守在崗位上。
隨著(zhù)分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，分子診斷和檢測技術(shù)如核酸雜交、核酸擴增和核酸序列分析變得越來(lái)越重要。樣品預處理占整個(gè)分析過(guò)程的60%，90%的檢測誤差發(fā)生在預處理環(huán)節。核酸的提取是分子診斷實(shí)驗的，也是最關(guān)鍵的一步。獲得的核酸質(zhì)量直接影響下游分子生物學(xué)實(shí)驗的成敗。
根據的實(shí)驗，血清血漿的量與DNA提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通過(guò)增加血清或血漿的量來(lái)實(shí)現。一般地，做血漿或血清核酸提取，樣本量在1ml以上。如果1ml或更大量樣本得不到滿(mǎn)意的檢測結果，則應及時(shí)考慮更換提取試劑盒。
我們知道一個(gè)典型的核酸檢測過(guò)程包括兩大步驟：核酸提取和核酸擴增。而核酸提取又包括裂解和純化。對于某些樣本（比如宮頸拭子洗脫液，鼻咽拭子洗脫液等），其成分相對簡(jiǎn)單，因此在核酸提取中可以把核酸純化步驟省略掉，因此叫免純化提取，有的也叫一步法提取。為了確保對后續PCR反應沒(méi)有明顯的抑制，這種提取方法一般也會(huì )加一步高溫讓蛋白質(zhì)失活。這種提取因為沒(méi)有經(jīng)過(guò)核酸純化，提取后的核酸溶液里殘留雜質(zhì)較多，稍有不慎，還是會(huì )對后續的PCR反應產(chǎn)生抑制。但是因為相對于全提?。◣в写胖榉ɑ蛘哌^(guò)柱法純化）而言，免純化提取步驟簡(jiǎn)單很多，更容易實(shí)現提取的全自動(dòng)，其在分子POCT領(lǐng)域也被經(jīng)常采用。
檢測員將待檢樣本放到生物柜前，進(jìn)行核酸提取。輕輕擰開(kāi)采樣管蓋子，檢測員用加樣槍吸取一定量的樣本液體，再小心放進(jìn)反應板中，樣本通過(guò)移液器被轉移到核酸提取板中完成轉樣，隨后放入自動(dòng)化核酸提取儀中，進(jìn)行核酸抽提。
核酸檢測主要分三個(gè)步驟，加樣，提取，擴增。加樣是用移液槍把樣本加到提取試劑盒里，提取是用磁珠法把核酸提取出來(lái)。擴增主要是我的，通過(guò)聚合酶鏈式反應（PCR），將病毒核酸特定片段不斷來(lái)擴增，以被儀器探測到，以此判斷是否存在病毒核酸。
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